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產(chǎn)品目錄
間充質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)分化試劑盒
更新時(shí)間:2024-11-11 點(diǎn)擊量:117

間充質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)分化試劑盒

,成脂誘導(dǎo)液

貨號(hào):YJ-MSCYD-004

價(jià)格: 1280.0

規(guī)格: 100ml    200ml

產(chǎn)品描述

本產(chǎn)品為團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化的間充質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)分化試劑盒,可增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞向成脂細(xì)胞分化的能力。

本產(chǎn)品僅用于科研用途,不可用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

產(chǎn)品組成成分及保存

試劑名稱

體積(100mL規(guī)格/200mL規(guī)格)

保存條件及有效期

誘導(dǎo)分化添加劑

5mL / 10mL

-20℃1 Year

誘導(dǎo)分化添加劑

0.1mL / 0.2mL

-20℃,1 Year

優(yōu)質(zhì)胎牛血清

10mL / 20mL

-20℃,1 Year

細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

85mL / 170mL

4℃1 Year

油紅O染色液

5mL / 10mL

4避光,1 Year

注意

1.為保證產(chǎn)品的有效性,請(qǐng)避免反復(fù)凍融。

2.配制好的誘導(dǎo)培養(yǎng)基保存于2-8℃,有效期為2周,請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量合理配制。

產(chǎn)品使用說明

1. 成脂誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基的配制

室溫條件下融化各因子及血清。各因子融化后,瞬時(shí)離心,使溶液集中于離心管底部。(注意:若因子或血清中有沉淀物,屬正?,F(xiàn)象,無須過濾,避免成分丟失。)

根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量,于無菌操作臺(tái)中配制誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基,建議每次配制50mL,配制比例見下表:

試劑成分

配制比例

50mL配制體系

誘導(dǎo)分化添加劑

5%

2.5mL

誘導(dǎo)分化添加劑

0.1%

50uL

優(yōu)質(zhì)胎牛血清

10%

5mL

細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

85%

42.5mL

2. 成脂誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)步驟

建議取第3~5代、純度達(dá)90%以上、狀態(tài)良好的間充質(zhì)干細(xì)胞,將其消化下來,離心收集,使用含10%FBS的完全培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞密度,均勻鋪于培養(yǎng)瓶/板中,置于37℃5%CO2,飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(細(xì)胞接種詳情參考表二

培養(yǎng)器皿

底面積

細(xì)胞量

培養(yǎng)液體積

24孔培養(yǎng)板

2cm/

2×105cell/

1mL/

12孔培養(yǎng)板

4.5cm/

4.5×105cell/

2mL/

6孔培養(yǎng)板

9.6cm/

9.6×105cell/

2mL/

T25培養(yǎng)瓶

25cm

25×105cell

5mL

6cm培養(yǎng)皿

21cm

21×105cell

5mL

10cm培養(yǎng)皿

55cm

55×105cell

10mL

表二

待細(xì)胞匯合度達(dá)80%~100%時(shí),即可進(jìn)行誘導(dǎo)分化。

小心吸棄細(xì)胞培養(yǎng)上清,沿孔壁緩慢加入提前配制好的誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基,置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(注意:完全培養(yǎng)基加入細(xì)胞前需提前置于37℃預(yù)熱。

2~3day換用新鮮的誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基。換液時(shí),若細(xì)胞培養(yǎng)上清顏色變?yōu)槌吻宓狞S色,是由于細(xì)胞量較大,培養(yǎng)基消耗較快導(dǎo)致的,請(qǐng)及時(shí)縮短換液周期。(注意:完全培養(yǎng)基加入前需提前置于37℃預(yù)熱。

細(xì)胞誘導(dǎo)3周后,即可進(jìn)行油紅O染色鑒定。

3. 油紅染色分析

細(xì)胞誘導(dǎo)分化結(jié)束后,小心吸棄細(xì)胞培養(yǎng)上清,1×PBS潤洗1~2次。加入適量細(xì)胞固定液,室溫固定30 min。(細(xì)胞固定液為4%中性甲醛溶液等,體積參考表二

配制油紅O工作液:油紅O貯存液與蒸餾水按照32配制,(例:油紅O貯存液3mL,蒸餾水2mL),混勻。使用濾紙過濾,收集濾液,即為油紅O工作液。(注意:成脂細(xì)胞內(nèi)的油滴極易脫落,操作時(shí)須謹(jǐn)慎。

細(xì)胞固定完成后,吸棄細(xì)胞固定液,1×PBS潤洗2次。沿孔壁緩慢加入適量油紅O工作液,室溫染色30min。(注意:油紅O工作液底部可能會(huì)有沉淀,吸取時(shí)盡量不要觸及底部。若細(xì)胞染色后有沉淀,PBS洗去即可。)

吸出染色液,PBS潤洗,去掉浮色。顯微鏡下觀察細(xì)胞染色效果。細(xì)胞內(nèi)油滴著色,呈紅色。(注意:油紅O工作液不可重復(fù)使用,不建議回收。

2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及論文潤色服務(wù),協(xié)助客戶各類實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤色十余年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時(shí)間、試驗(yàn)條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù):



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